本文標題："血管內皮細胞培養步驟簡介-實驗教學顯微鏡"
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血管內皮細胞培養步驟簡介-實驗顯微鏡
(1)顯微鏡下無菌條件，剪取一段長為10---15cm動物大血管(頸總動脈、股動脈等)
或人的臍靜脈，將其放人盛有PBS液的培養皿中。
(2)用眼科剪及眼科攝剔除附著在血管外壁上的結締組織.
(3)將PBS液注人血管中，沖洗管腔中的殘血.
(4)用PBS液洗滌血管3-4次。
(5)血管的一端用止血鉗夾緊或用細線結扎，另一端插人靜脈留置針.
用細線將其結扎、固定。
(6)利用靜脈留工針將0.1%的膠原酶注人血管中，使之充盈，于37't消化3^-15min,
(7)在血管的游離端剪開一小切口，將消化液收集于離心管，用溫熱的培養液沖洗
血管腔3次.也收集于離心管中。
(8) 1000r/min離心10min，棄上清。
(9)向離心管中加人培養液，吹打制懸.
(10)將細胞接種于培養瓶中，于37℃培養，每隔2-3d換液1次。
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